IDDM牙周病患者龈沟液IL-1β的检测与剖析

［摘要］　目的：比拟胰岛素依赖性糖尿病（IDDM）牙周病患者与全身安康者龈沟液IL-1β的差别及这一炎症介质水平与糖代谢情况的关系。办法：用ELISA法测龈沟液IL-1β水平，同时测IDDM病人糖化血红蛋白（HbA1c）浓度。后果：IDDM病人龈沟液IL-1β含量分明高于对照组，中重度牙周炎中这一炎症介质浓度分明高于轻度牙周病。龈沟液IL-1β水平不与反映糖代谢控制情况的糖化血红蛋白浓度相关。结论：龈沟液IL-1β水平在受部分环境影响的同时，也受全身要素调控。糖尿病人因全身反应异常，龈沟液IL-1β会大幅度上升，从而招致重度牙周炎发作。

糖尿病是牙周病重要的风险因子，糖尿病促进牙周组织毁坏与龈沟液 (gingival crevicular fluid, GCF) 炎症介质水平改动亲密相关［1，2，3］。笔者采用ELISA法测量了28名胰岛素依赖性糖尿病（insulin dependent diabetes mellitus, IDDM）牙周病患者及54名全身安康者的GCF-IL-1β水平，研讨了GCF-IL-1β与反映糖代谢控制情况的糖化血红蛋白(HbA1c)浓度的互相关系，并就糖尿病人这一细胞因子水平变化对牙周组织的影响进行了剖析。

资料与办法

1. 病例选择及分组　从中山医科大学隶属第一医院门诊病人中选IDDM型牙周病患者。病人全为自愿者，满足以下条件：①依据1985年WHO规范被诊断为IDDM至少1年以上；②过去6个月内未服用抗生素，过去3个月内未服用非甾体类抗炎药；③无其他全身异常情况。从本院牙周科门诊病人中选全身安康者作为对照。④不断采用胰岛素医治，近期病情没有变化。

依据Salonen等法［4］从X全景片计算X线均匀牙槽骨丧失(mean alveolar bone loss,ABL )，然后将IDDM病人依据牙周病水平随机分为A、B两组。将全身安康者分为C、D、E三组作为对照。A、D组为轻度牙周病人，ABL＜30%。B、E组为中重度牙周病患者，ABL≥30%。C组牙周正常。

2. 糖化血红蛋白（HbA1c）水平的测定　用美国BLORAD公司生产的专用微柱和比色系统测IDDM病人的HbA1c水平。

3. GCF的采集与定量　去除龈上牙石、菌斑、清水漱口后休息10min。用搜集GCF的滤纸（Interstate Drug Exchange，Amityville，New york）插入待测牙的龈沟或牙周袋内，停留1min取出，放入微离心管内，用电子天平称其重量，与采集前重量相减，即为GCF重量，换算成GCF体积。

测量后将纸条的浸润局部剪入含1ml 10% FCS RPMI1640培育液的冻存管中，每只冻存管中搜集1例患者的GCF，在无菌操作台内过滤，并保管于－20℃的冰箱待测。

4. IL-1β的检测：试剂为美国Biosource公司产品（Total Human, IL-1β ELISA试剂盒）。使用ELISA办法在本院中心实验室检测，检测步骤按产品阐明书进行。

5. 统计剖析: 采用t检验和直线相关法剖析。

结果

实验组与对照组中，中重度牙周炎病人均匀年龄较大（P＜0.01），IDDM患者中，多数糖代谢控制不良，但A组与B组HbA1c 水平无分明差别（P＞0.05）。IDDM病人GCP- IL-1β明显高于对照组（P＜0.01）。实验组中，中重度牙周病患者GCF-IL-1β水平明显高于轻度牙周病人（P＜0.01），其中A组、B组GCF-IL-1β值辨别明显高于D组、E组（P＜0.01）。直线相关剖析后果标明：GCP-IL-1β不与HbA1c浓度相关。糖尿病患者与全身安康者GCP-IL-1β及HbA1c水平见附表。

附表 糖尿病患者与全身安康者GCF-IL-Iβ及HbA1c水平(±s)

讨论

IL-1β是一种具有多种生物学活性的细胞因子，在牙周炎免疫毁坏中起重要作用。研讨标明：IL-1β能间接或协同其他细胞因子间接刺激骨吸收，抑制骨构成；增加基质金属蛋白酶和丝氨酸蛋白酶表达，抑制金属蛋白酶组织抑制因子，招致结缔组织降解；抑制人牙周韧带成纤维细胞碱性磷酸酶基因的表达，在牙周病灶中，不利于硬组织构成和骨性愈合［5，6］。

本研讨中，IDDM牙周病人GCF-IL-1β明显高于牙周情况相同的全身安康者，这与Salvi等［1］的研讨后果一致。标明GCF-IL-1β水平在受部分环境影响的同时，也受全身要素调控。其调控的能够机理如下：

糖尿病人的糖代谢终未产物（advanced glycation end products AGEs）是不能被酶分解的糖蛋白和脂类，糖水平的迟缓升高能加速AGEs的构成与聚集。由于在血管壁上，单核细胞和内皮细胞都有被称为RAGEs的AGEs的特殊受体，它一旦被激活，就能增加氧化压力，上调炎症介质的表达。

B组病人GCP-IL-1β明显高于A组的缘由能够是前者的年龄较大，患IDDM的时间相对较长，因而处于高糖血症形态的时间也就较长。由于AGES的大量堆积，招致单核细胞高水平的IL-1β的表达。

IDDM病人中，代谢紊乱有能够使单核细胞释放过量炎症介质，并因而加重牙周病变。但是本研讨未能证明GCF-IL-1β与反映糖代谢控制情况的HbA1c的正相关系。这能够与我们未能掌握这些糖尿病人的发病时间、继续时间及总的代谢控制史有关。

［作者简介］　付云(1965-)，男，讲师，主治医师，目前从事糖尿病型牙周病骨吸收的分子机制研讨。

付云(中山医科大学光华口腔医院，　广东　广州　510080)

凌均棨(中山医科大学光华口腔医院，　广东　广州　510080)

李延兵(中山医科大学第一隶属医院，　广东　广州)

张侬(武汉一冶职工医院，　湖北　武汉)

欧阳勇(中山医科大学光华口腔医院，　广东　广州　510080)

参考文献

［1］Salvi GE, Yalda B, Collins JG etal Inflammatory mediator response as a potential risk marker for periodontal diseases in insulin-dependent diabetes mellitus patients［J］. J Periodontol, 1997,68(2)∶127-135

［2］Luger A, Schernthaner G, Urbanski A, et al. Cy tokine production in patients with newly diagnosed insulin-dependent (type 1 ) diabetes mellitus［J］. Eur J Clin Invest, 1988,18∶233-236

［3］李威，耿素芳，沙月琴. 糖尿病和牙周病的关系［J］. 口腔医学纵横，2000，增刊，42-43

［4］Salonen LWE, Frithiof L, Wouters FR et al. Marginal alveolar bone height in an adult Swedish population. A radiographic cross-sectional epidemiologic study［J］. J Clin Periodontol,1991,18∶223-232

［5］Birkedal-Hansen H. Role of cytokines and inflammtory mediators in tissue destruction［J］. J Periodont Res,1993, 28∶500-510

［6］牛忠英, 史俊南, 肖明振等 IL-1β对HPLF碱性磷酸酶基因表达的影响［J］. 中华口腔医学杂志，1993, 28(2)∶73-74