CXCR7在口腔鳞癌中的表达及其与临床病理特征的关系

作者单位：1.海南医学院热带医学与检验学院;2.厦门口腔医院口腔颌面外科

【摘要】 目的：探讨CXCR7在口腔鳞癌组织中的表达及其与口腔鳞癌临床病理特征的关系。方法：采用免疫组织化学法检测48例口腔鳞癌组织标本与20例正常口腔黏膜标本中CXCR7的表达，比较不同临床病理特征(包括癌组织分化程度、临床分期及有无淋巴结转移)口腔鳞癌患者CXCR7表达。结果： CXCR7主要表达于细胞浆及细胞膜，于口腔鳞癌组织中的高表达率达81.2%(39/48)，而正常口腔黏膜组织中未见表达或仅有微弱表达，二者差异有统计学意义(P<0.005);CXCR7高表达与癌组织分化程度、TNM分期及淋巴结转移密切相关(P<0.05)，而与肿瘤大小无明显关系(p>0.05)。结论： CXCR7高表达在口腔鳞癌的发生、发展及浸润转移过程中可能起一定作用;CXCR7有望成为判断口腔鳞癌患者预后及选择治疗方案的一个新靶点。

【关键词】  CXCR7;口腔鳞癌;免疫组化法;高表达

[ABSTRACT] Objective： To explore the expression of CXCR7 in oral squamous cell carcinoma (OSCC) and to evaluate the expression of CXCR7 and the clinicopathology factors of OSCC. Methods： CXCR7 protein expression and its relation to clinico-pathological features of OSCC were examined in 20 normal oral tissues and 48 OSCC by immunohistochemical SP methods. Results： The overexpression rate of CXCR7 in OSCC was 81.2%(39/48)，which was significant higher than that of the control group 25%(5/20) (P<0.005); The overexpression of CXCR7 among the lower differentiated tissues were significant higher than the middle/ higher differentiated tissues of OSCC (P<0.05) ， and the findings were similar among the groups of the Ⅲ、Ⅳ clinical stages than Ⅰ、Ⅱ clinical stages， and lymph node involvement than the non- lymph node involvement of OSCC(P<0.05). Conclusion： The overexpression of CXCR7 might be play an important role in the pathogenesis and development of OSCC， and it might be a target for the therapy and prognostic indicator of OSCC.

[KEY WORDS] CXCR7; Oral squamous cell carcinoma; Immunohistochemical; Overexpression;

口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤，极易向颈部淋巴结转移，侵袭力较强。趋化因子受体属于G蛋白耦联跨膜受体，通过与其配体结合发挥多种生物学功能，如促进细胞生长、发育、分化、凋亡等[1] 。近年来研究表明，趋化因子及其配体网络对肿瘤细胞的发生和转移起重要作用。CXCR7是新近发现的一种趋化因子受体，配体为CXCL12。研究证明CXCR7在乳腺癌、肺癌、肝癌、宫颈癌等常见恶性肿瘤中高表达，且与肿瘤的侵袭和转移密切相关。但关于CXCR7在口腔鳞癌中的表达及其与颈部淋巴结转移的关系尚未见报道。本研究采用免疫组织化学染色法检测CXCR7在口腔鳞癌中的表达及与颈部淋巴结转移的关系，探讨其在口腔鳞癌发生、发展中的作用。

1、材料与方法

1.1　标本来源

48例口腔鳞癌(OSCC)组织标本来自2004～2010年厦门口腔医院口腔颌面外科手术切除的标本，术后均经病理诊断证实为高、中、低分化口腔鳞癌，男性29例，女性19例;年龄30～74岁，平均49.3岁;有颈部淋巴结转移者31例，无颈部淋巴结转移者17例;肿瘤直径：≤3cm 21例，>3 cm 27例;病理分级：中、高分化16例，低分化32例;TNM分期：Ⅰ、Ⅱ 期 19例，Ⅲ、Ⅳ期29例。 所有病例术前未接受放疗、化疗。另取20例外伤或门诊拔牙患者的正常口腔黏膜作为正常对照。所有标本均经4%多聚甲醛液固定，常规石蜡包埋，制成4 μm厚连续切片。

1.2　 主要试剂

兔抗人CXCR7多克隆抗体购至美国Abcam公司;免疫组化超敏SP染色试剂盒、DAB显色试剂盒均购至武汉博士德生物科技公司。

1.3　实验方法

石蜡切片经二甲苯、梯度酒精脱蜡至水，以柠檬酸盐缓冲液高温高压修复抗原，自然冷却至室温，H2O2阻断内源性过氧化物酶，正常非免疫兔血清封闭20 min。随后滴加一抗，37℃孵育1 h，以PBS代替一抗作为阴性对照，已知的阳性OSCC标本作为阳性对照;PBS漂洗3次，滴加生物素标记的二抗，37℃孵育30 min，PBS漂洗3次;滴加链霉亲和素-过氧化物酶溶液，37℃孵育15 min，PBS漂洗3次;DAB显色，蒸馏水漂洗;苏木素复染，脱水，透明，封片。

1.4　免疫组化结果判断

CXCR7阳性表达主要定位于细胞浆和细胞膜，少数定位于细胞核，呈棕黄色颗粒。采用双盲法统计结果，随机选取5个高倍视野(×400)计数，统计阳性细胞所占的百分比，根据阳性细胞百分比将染色结果分为4个等级：阳性细胞≤5%为 (-);6%～25%为(+);26%～50%为(++); >50%为(+++)，(-)及(+)归为不表达组或低表达组，(++)及(+++)归为高表达组。

1.5　统计学处理

应用SPSS 13.0统计软件进行统计分析，计数资料比较采用χ2检验，P<0.05认为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 MAT1蛋白在口腔鳞癌及正常口腔黏膜组织中的表达情况

CXCR7主要表达于口腔鳞癌组织，棕黄色颗粒主要局限于细胞浆和细胞膜，少数定位于细胞核。CXCR7在口腔鳞癌组织中高表达(图1)，在正常口腔黏膜组织中不表达或仅有微弱表达(图2),2种组织中CXCR7的高表达率分别为81.2%(39/48)和25.0%(5/20)。在这些标本中，31例发生颈淋巴结转移的患者中有28例淋巴结转移灶中CXCR7高表达，高表达率为90.3%。口腔鳞癌组织中CXCR7高表达率与正常口腔黏膜相比差异有统计学意义(P<0.05)(表1)。图1 CXCR7在口腔鳞癌图2 CXCR7在正常口腔组织中的表达(×400)黏膜组织中的表达(×400)

2.2 MTA1蛋白表达与口腔鳞癌临床病理特征的关系

肿瘤直径>3 cm组CXCR7高表达率稍高于≤3cm组，但差异无统计学意义(P>0.05);低分化组CXCR7高表达率显著高于中、高分化组，差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ、Ⅳ期与Ⅰ、Ⅱ期相比，有淋巴结转移组与无淋巴结转移组相比CXCR7高表达率均明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)(表2)。表1　CXCR7在口腔鳞癌及正常口腔黏膜组织中的表达 表2 CXCR7表达与OSCC临床病理特征的关系。